Hongos Oportunistas. Cryptococcus agente causal de la Criptococosis ¿lo conoces?

in #stem-espanol6 years ago (edited)

Hola amigos de Steemit. En esta oportunidad les traigo un aporte para que conozcan mas acerca de esta micosis oportunista de gran importancia en pacientes inmunocomprometidos, cuyos hallazgos microbiologicos son bien interesantes.


Criptocococis

Es una micosis oportunista, exógena, cosmopolita, y puede ser de curso agudo o crónico. Es causada por levaduras capsuladas del género Cryptococcus, principalmente del Complejo Criptococcus neoformans/Criptococcus gattii.

C. neoformans exhibe dos variedades: var. grubii (serotipo A), var. neoformans (serotipo D) y un hibrido de C. neoformans (serotipo AD); su forma sexual (teleomorfa) corresponde a Filobasidiella neoformans. Esta especie se ha aislado en la naturaleza en casi todo el mundo, asociada a excrementos de aves, sobre todo, palomas y en gallineros; C. gattii serotipos B y C, cuya forma sexual es Filobasidiella bacillispora, se aísla de detritus, flores y oquedades de árboles como los eucaliptos, acacias, ficus y almendros.

La criptococosis se adquiere por inhalación de blastoconidias poco capsuladas. En el hospedero, C. neoformans desarrolla una capsula polisacarida protectora. La mayoría de las infecciones pulmonares son asintomáticas y se resuelven espontáneamente; sin embargo, el hongo puede permanecer latente por largos periodos y se puede activas cuando las defensas del individuo se debilitan. En este caso el hongo se multiplica produciendo una enfermedad pulmonar y se disemina por vía hematógena a otros órganos, principalmente al Sistema Nervioso Central (SNC). Las presentaciones más frecuentemente son la meningitis y la meningoencefalitis y con menos frecuencia, pueden ocurrir lesiones en vísceras, hueso, piel, riñón y próstata.

Crypto imagen inicial.png
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En esta micosis de amplia distribución mundial, la mayoría de los casos, especialmente en los pacientes infectados con VIH, son causados por C. neoformans var. grabii serotipo A y la infección causada por C. gattii ocurre principalmente en pacientes inmunocompetentes que residen en zonas tropicales y subtropicales.

Paciente.jpg
Lesiones moluscoides en el rostro de un paciente con criptococosis asociada al SIDA.
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Características generales de los agentes etiológicos:

Criptococcus neoformans y C. gattii generalmente presentan forma de levaduras esféricas, ovoides y a veces de forma alargada, con gemación unipolar y, en muy pocas ocasiones, multipolar. Crecen bien a 37º C en los medios de cultivos habituales de micología, como agar Sabouraud dextrosa (SDA) y no tienden a formar pseudomicelio. Ciertas características morfológicas se asocian especialmente con cada una de las especies. El aspecto de las colonias de C. gattii son generalmente más mucosas y más húmedas que las colonias de C. neoformans.

crypto1 Agar Sabouraud.jpg
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Sin embargo, estas especies poseen características generales comunes que no permiten identificarlas en el laboratorio de rutina, solo con aplicación de pruebas especiales. Ambas son ureasa positivo al sembrarlas en medio ureasa de Christensen, poseen capsula que se evidencia con tinta china.

Diagnostico micológico

Muestra Clínica:

Liquido cefaloraquideo (LCR), esputos, lavado broncoalveolar, orina, biopsias, sangre, medula osea, exudado de ulceras, material purulento, otras.

Examen directo:

  • Al fresco: con tinta china. El LCR debe centrifugarse y se usa el sedimento para estudios micológicos.
  • Coloraciones histológicas: Hematoxilina-eosina, PAS, Grocott, Azul de Alcian, Mucicarmina de Mayer.

Grocott.jpg
Cúmulo de levaduras capsuladas en el material obtenido por escarificación de las lesiones cutáneas en preparaciones teñidas con Grocott (1000X)
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Hallazgos:
Se observan blastoconidias encapsuladas, redondas u ovaladas, de 4-6µm de diámetro; a veces por el tamaño de la capsula alcanzan un diámetro hasta 12-20µm. Usualmente tienen gemación única, es múltiple o en cadena. Hay inclusiones citoplasmática, la pared es gruesa y refringente.

En muestras de LCR, es importante establecer la diferencia con los leucocitos, que, algunas veces, se observan rodeados de un halo difuso.

Nota: En las preparaciones al fresco, para observar la capsula, se baja el condensador, se cierra el diafragma y se observa con poca luz. Con la Mucicarmina de Mayer, la capsula de C. neoformans toma un color rojo brillante que permite diferenciarlo de otras levaduras de tamaño similar. Con coloraciones como Grocott y PAS, se tiñen la pared de la blastoconidia, mientras que la capsula no se tiñe, y queda como un espacio vacío entre la capsula y las células.

Mucicarmin.jpg
Cúmulo de levaduras capsuladas en el material obtenido por escarificación de las lesiones cutáneas en preparaciones teñidas con Mucicarmín de Mayer (400X)
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Reporte del examen directo con tinta china:

Se observan blastocinodias encapsuladas compatibles con Cryptococcus sp.

cryptococcus_directo Tinta China.jpg
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Cultivo:

Se obtiene fácilmente en los medios rutinarios. Se puede utilizar Sabouraud o medio casero con cloranfenicol, sin actidiona (ya que inhibe su crecimiento). Tienen desarrollo óptimo a 32-37ºC y se inhibe a 40ºC. Las colonias aparecen a las 48horas. Son de tipo levaduriforme, de color blancuzco, cremoso, lisas y brillantes, húmedas, mucoides y se escurren en el medio de cultivo.

La identificación de la levadura se basa en sus características fenotípicas tipo enzimático (ureasa y fenoloxidasa) y los patrones de asimilación de carbohidratos. Cryptococcus sp. no fermenta los carbohidratos, asimila dextrosa, galactosa, maltosa y sacarosa. Hidroliza la ureasa y aumenta el pH. C. neoformans y C. gattii son los únicos del género que utilizan la enzima fenoloxidasa. Se diferencia de otras levaduras no patógenas del género porque utiliza galactosa pero no lactosa ni el nitrato de potasio.

crypto9Ureasa.jpg
Cryptococcus neoformans. Derecha: Ureasa +.
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La diferencia entre especies se realiza en el medio canavanina-glicina-azul de bromotimos (CGB) y de serotipos por reacciones de aglutinación con antisueros específicos.

crypto_cultivo3 CGB.jpg
Crecimiento en agar CGB (canavanina-glicina-azul de bromotimol), útil para diferenciar a los agentes etiológicos de la criptococosis: C. neoformans (Cn) y C. gattii (Cg).
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lgotitmo de identificacion.png

Algoritmo para la clasificación de las principales especies de Cryptococcus. (Tomada de Segretain G., 1980)
Fuente: tomado de Arenas R. Micología Medica Ilustrada: micosis oportunistas, criptococosis. 5ta ed. México: McGraw-Hill. c2014. p. 267

"El mundo desde el microscopio es algo maravilloso" sígueme: @fran.frey (Estudiante UCV-Venezuela)


Fuentes:

  1. Bonifaz JA. Micología Médica Básica: Micosis y seudomicosis por hongos oportunistas, Criptococosis. 4ta ed. México: McGraw-Hill. c2012. p. 348-362

  2. Arenas R. Micología Medica Ilustrada: micosis oportunistas, criptococosis. 5ta ed. México: McGraw-Hill. c2014. p. 261-269

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Excelente articulo fran. Saludos.

Muchas gracias... Saludos.

Buena información amigo gracias por compartirla, también soy amante de la microscopia, estudio bioanálisis. un saludo

Gracias. Que bien. Saludos.

waaooo creí que era una parodia a la cryptoeconomia

jeje. No lo habia pensado de esa manera. :D

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